Эта длинная статья описывает процесс планирования и проведения эксперимента на себе с использованием антиоксидантов с подтвержденным эффектом, оказывающих прицельное действие на митохондрии. Для того чтобы оценить действие антиоксиданта, показатели состояния сердечно-сосудистой системы оцениваются до начала и после окончания эксперимента. Описанная в статье схема эксперимента позаимствована из недавно опубликованного небольшого клинического исследования, однако при этом диапазон методов оценки был сужен до экономически эффективных, не требующих особых навыков и подходящих для самостоятельного проведения подходов.
Данная схема публикуется не для того, чтобы подтолкнуть людей к ее немедленному осуществлению. Целью публикации является иллюстрация подхода к проведению экспериментов на себе, посвященных тестированию вмешательств, потенциально способных улучшить состояние здоровья или устранить проявления старения. Для этого экспериментатор должен: установить свои ограничения, определить наиболее подходящие подходы, провести исследование для выяснения необходимых деталей, составить план действий, возможно, проанализировать некоторые аспекты предварительно (например, дозировки, так как они достаточно часто не оказывают ожидаемого действия) и, что наиболее важно, с учетом всех возможных рисков установить, действительно ли «игра стоит свеч». В конечном итоге решение о проведении эксперимента является личным выбором.
Зачем экспериментировать на себе с антиоксидантами, прицельно действующими на митохондрии?
Принято считать, что обычные антиоксидантные пищевые добавки в долгосрочной перспективе оказывают умеренно выраженное вредное действие на здоровье. Например, они блокируют сигнальные пути, важные для проявления полезных реакций на физические нагрузки. С другой стороны, продемонстрирована способность воздействующих на митохондрии антиоксидантов немного замедлять процесс старения у короткоживущих видов, улучшая при этом показатели состояния здоровья. Их применение также оказалось жизнеспособным методом лечения ряда локализованных воспалительных состояний. Это объясняется теорией, согласно которой митохондрии в процессе своей жизнедеятельности генерируют окислительные молекулы, вызывающие повреждения в самих митохондриях, что, в свою очередь, ведет к появлению нефункциональных клеток, митохондрии которых продуцируют огромное количество окислительных молекул. Обеспечение постоянного поступления прицельно воздействующих на митохондрии антиоксидантов может замедлить скорость, с которой митохондрии повреждают сами себя, уменьшить последствия появления клеток с поврежденными митохондриями или оказывать оба эффекта.
Одним из таких последствий является поступление в окружающие ткани и кровоток большого количества окислительных молекул, реагирующих там с липидами. Окисленные липиды могут наносить еще больший вред для всех клеточных процессов, однако наибольший интерес представляет собой развитие атеросклероза. Окисленные липиды могут запускать развитие неадекватных окислительных реакций в стенках кровеносных сосудов, а некоторые их формы также способны приводить к тому, что реагирующие на это воспаление клетки истощаются и погибают. Таким образом происходит формирование липидных бляшек при атеросклерозе, приводящее к ослаблению главных кровеносных сосудов и сужению их просвета. Снижающие уровень холестерина в крови препараты класса статинов обеспечивают замедление прогрессии атеросклероза за счет снижения количества окисленных липидов, являющегося последствием уменьшения общего количества липидов.
Считается, что в дальнейшем нарушения способности гладкой мускулатуры сосудистой стенки, ответственной за сокращение и расширение сосудов, в определенной степени обусловлены повышающимся уровнем окислительного стресса при старении (чем больше поврежденных митохондрий, тем больше окислительные молекул). Это способствует уплотнению сосудистых стенок и развитию гипертонии, сердечно-сосудистых заболеваний и т.п. Подавление окислительных последствий нарушения функций митохондрий также может оказывать положительное влияние на организм.
Прицельно воздействующие на митохондрии антиоксиданты не устраняют первопричину проблемы. В лучшем случае, они несколько компенсируют или ослабляют протекающие процессы. Однако они дешево стоят и если они способны оказывать влияние на факторы риска развития сердечно-сосудистых заболеваний примерно в той же степени как статины, то их применение может быть хорошей идеей.
Предостережения
Тогда как некоторые воздействующие на митохондрии антиоксиданты уже одобрены для применения, широко используются и имеются в свободном доступе или сопровождаются клиническими данными, которых достаточно для оценки возможных рисков, при проведении эксперимента на себе человек должен помнить о личной ответственности. Во-первых, необходимо прочитать литературу, описывающую выбранный антиоксидант, а именно его эффекты, возможные побочные эффекты и дозировки. После этого на основе полученной информации следует принять собственное решение касательно возможного риска и уровня комфортности эксперимента. Это касается любой пищевой добавки, независимо от того, получила ли она официальное разрешение для применения или нет. Не доверяйте различным мнениям, которые можно прочитать в интернете. Лучше обратиться к первоисточникам и научным статьям. Следует понимать, что в случае ограниченного количества первичных данных они могут быть ошибочными или неполными, что чревато нежелательными последствиями. Также надо понимать, что в силу физиологических особенностей пожилые люди могут быть более чувствительными и подверженными различным воздействиям, что не всегда описано в исследованиях.
Во-вторых, хотя исследования в области воздействующих на митохондрии антиоксидантов за последнюю декаду не совершили значительного движения вперед, они медленно, но все же продвигаются. Через какое-то время эта статья утратит актуальность, так как на сцене появятся новые данные и новые антиоданты. Однако описанная в ней общая схема останется полезным инструментом для планирования новых экспериментов на себе с использованием более новых и, возможно, более эффективных соединений, а также методов оценки результатов.
И наконец, получение и использование случайных соединений, пока не получивших одобрение для клинического использования в вашей стране, таких как SkQ1, согласно описанному в данной статье плану, является потенциально нелегальным. Однако во многих случаях продажа таких продуктов разрешена для исследовательских целей. Поэтому зачастую имеющие хорошую репутацию продавцы заявляют, что реализуемые ими продукты не предназначены для личного использования, осознавая, что часть покупателей приобретает данные продукты именно для этой цели.
Выбор антиоксидантов, прицельно воздействующих на митохондрии
Существует два достойных внимания антиоксиданта, прицельно воздействующих на митохондрии: MitoQ и SkQ1. Их эффекты подтверждены наибольшим количеством научных данных, в том числе результатами клинического применения. Эффективность третьего соединения, известного как SS-31, также подтверждена научными данными, однако оно вводится в виде инъекций. Вполне может быть, что одно из этих соединений действует значительно лучше, чем другие (с большой вероятностью это SkQ1), однако при проведении эксперимента на себе не существует убедительной причины отдавать предпочтение инъекционному препарату перед средствами для перорального применения.
Определение дозировок
Единственный действующий метод подбора оптимальной дозировки фармацевтической добавки – это проведение крупных клинических исследований. Результаты исследований на мышах могут только указать на наиболее перспективную точку отсчета для проведения экспериментов по подборы дозировок для человека, однако адекватных подходов к вычислению этой точки отсчета в большинстве случаев не существует. Установленный алгоритм в целом аналогичен для большинства лекарственных препаратов для перорального приема и внутривенного (или внутрибришинного в случае мелких животных) введения, однако они не всегда применимы к другим методам введения. Взаимосвязь между различными формами введения, дозировкой и оказываемыми эффектами в действительности является сложным и неожиданно плохо изученным вопросом. Некоторые соединения, являются исключениями из правила, и единственным способом, позволяющим специалистам выявить эту исключительность, является тестирование различных дозировок на разных животных моделях.
К счастью, эффекты воздействующих на митохондрии антиоксидантов подтверждены результатами клинических исследований, поэтому этап подбора начальной дозы на основании экспериментов на мышах можно пропустить. Просто используйте дозировки, применявшиеся в клинических исследованиях. При отсутствии этих данных придется вычислить начальную дозировку на основании экспериментов на мышах. Для этого сначала надо прочитать статьи, описывающие проведенные на мышах исследования выбранного препарата. Дозы препаратов для перорального применения обычно указываются в мг/кг массы тела. После этого надо применить специальный инструмент для пересчета указанной дозировки в приемлемые для человека дозы, описанный в находящейся в открытом доступе статье A simple practice guide for dose conversion between animals and human. Простой пересчет дозировки на массу тела человека в килограммах в данном случае неприменим. Относительная площадь поверхности тела представителей разных видов является более адекватным коэффициентом пересчета. В любом случае, следует понимать, что на начальном этапе подбора дозы прогнозировать результат очень сложно. Однако продолжительность терапии очень четко отражается на результате. При проведении эксперимента следует начинать с количества приемов препарата, продолжительностью промежутков между приемами и продолжительностью терапии, применяемых в исследованиях на животных.
MitoQ
В данном случае вся подготовительная работа уже сделана. В проведенном в 2018 году клиническом исследовании на протяжении 6 недель участники получали 20 мг препарата ежедневно, и эту дозировку вполне можно взять за начальную.
SkQ1
Случай с SkQ1 более сложный, так как это соединение изначально получило одобрение как препарат для лечения воспалительного заболевания глаз под названием визомитин, и бОльшая часть клинических данных получена для его применения в качестве глазных капель. В данном случае применяемые дозировки невозможно экстраполировать на препарат для перорального применения, который в настоящее время находится на очень ранней стадии регулятивного процесса. В одном из пожизненных исследований на мышах добавляемая в питьевую воду дневная доза препарата варьировала в диапазоне 0,7-1,0 микромоль/кг. При пересчете на человека с массой тела до 60 килограмм дозировка составляет 3,5-5,0 микромоль в день. Продолжительно терапии в рамках исследования составила 150 дней, однако само исследование на этом не закончилось, так как его целью была оценка продолжительности жизни животных. Однако для оценки краткосрочных эффектов препарата более целесообразно использование 6-недельного протокола из исследования с применением MitoQ.
Глазные капли визомитин продаются во флаконах объемом 5 мл в виде раствора с концентрацией 0,155 мкг/мл. Для пересчета из микрограммов в микромоли необходимо знать молекулярную массу SkQ1, как указано на сайте PubChem, составляющую 617,608 г/моль. Таким образом, дневная доза 5 микромоль = 0,000005 x 617,608 = 0,0031 г = 3100 мкг = 3,1 мг (4 флакона, в России самые дешевые стОят почти 500 рублей). Поэтому приобретение визомитина для перорального приёма нецелесообразно.
Подтверждение всего, указанного выше
Предположите, что все публикации, за исключением первоисточников, могут быть некорректными или вводящими в заблуждение. Не берите ничьи слова на веру, найдите первоисточники, пересчитайте цифры и сделайте собственные умозаключения.
Приобретение антиоксидантов, воздействующих на митохондрии
MitoQ
MitoQ стоит недорого и его можно приобрести у компании MitoQ Limited через несколько имеющих хорошую репутацию онлайн-магазинов. Поиски более дешевых источников не стоят трудов, так как потом вам придется подтверждать качество продукта. Просто приобретите препарат в магазине.
SkQ1
Появление таблетированных форм препарата для перорального приема является вопросом нескольких лет. Однако на сегодняшний день задача заключается в поиске производителя или поставщика на мировом рынке с последующей проверкой качества продукта. Для людей, не имеющих нужных связей, лучшим способом приобретения продуктов, еще не поступивших в массовое производство, является их заказ у производителей в Китае или других регионах. Основным инструментом поиска китайских производителей является торговая площадка Alibaba. [В оригинале статьи подробно описан процесс поиска и заказа препаратов на китайский торговых площадках.]
Как уже было упомянуто выше, подобное приобретение препаратов, не одобренных для применения человеком в вашей стране, является до определенной степени нелегальным. Самым худшим вариантом развития событий в данном случае является конфискация продукта на таможне. Однако в разных странах ситуации могут быть разными, поэтому перед тем, как заказывать препарат из Китая, следует тщательно изучить этот вопрос.
Хранение воздействующих на митохондрии антиоксидантов
Как MitoQ, так и SkQ1 имеют длительный срок годности при хранении в морозильной камере. Для более удобного применения на протяжении коротких периодов времени – от нескольких недель до нескольких месяцев – их можно хранить в темноте в холодильнике. SkQ1 менее устойчив, чем MitoQ, и при комнатной температуре разлагается в течение нескольких недель.
Проверка качества приобретенных антиоксидантов
За качества продукта компании MitoQ Limited волноваться не стоит, однако другие источники не всегда заслуживают доверия. Получив заказанный из-за рубежа препарат, вы не можете быть уверены в том, что его состав соответствует заявленному, что он не содержит примесей и не имеет надлежащего качества по каким-либо другим параметрам. Проверить это можно только отдав образец препарата в лабораторию для проведения анализа с помощью жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии. После этого полученные результаты необходимо сравнить со стандартными данными для образца высокой степени очистки. [В статье подробно описан процесс упаковки и отправки образцов препарата в лабораторию для анализа.]
Методы приема препаратов
MitoQ Limited выпускает препарат MitoQ в удобной таблетированной форме, не требующей дополнительных манипуляций. Остается только принимать необходимое количество таблеток. При заказе у других производителей вы можете получить как спиртовой раствор, так и порошок. SkQ1 обычно представляет собой порошок, который для употребления надо будет перевести в раствор. Ни MitoQ, ни SkQ1 не растворяются в воде. В сухом виде их можно растворить в минимальном количестве этилового спирта. Получившийся раствор надо будет с помощью пипетки добавлять в стакан с водой и выпивать его. Этот подход позволяет примерно воспроизвести метод введения препарата в организм, применяемый в большинстве исследований на животных моделях.
Определение необходимых тестов и оцениваемых параметров
В данном случае необходимо определить комплекс тестов, которые (а) соответствуют ожидаемому результату на основании данных клинических исследований прицельно воздействующих на митохондрии антиоксидантов и (б) могут проводиться без участия врача. Эти тесты должны оценивать состояние сердечно-сосудистой системы, в особенности параметры, зависящие от эластичности сосудов. Помимо этого определенное внимание необходимо уделить параметрам оценки уровня окислительного стресса и степени развития атеросклероза.
- стандартный анализ крови с маркерами воспаления;
- оценка уровня окисленного холестерина липопротеидов низкой плотности;
- частота сердечных сокращений и артериальное давление в состоянии покоя;
- вариабильность частоты сердечных сокращений;
- скорость распространения пульсовой волны;
- определение биологического возраста по профилю метилирования ДНК.
Входящие в этот список параметры состояния сердечно-сосудистой системы зависят от изменений эластичности или функциональности кровеносных сосудов, которые являются ожидаемым результатом терапии, предположительно компенсирующей влияние старения на гладкомышечные клетки стенок кровеносных сосудов, в данном случае – антиоксидантов, прицельно воздействующих на митохондрии. Положительных изменений средних значений большинства этих параметров можно добиться с помощью длительных активных тренировок, и сокращение этого периода с помощью фармакологического вмешательства является весьма интересной перспективой.
Лабораторный анализ крови
[В оригинале статьи приводятся онлайн-сервисы, позволяющие оперативно проводить лабораторные исследования в США.]
Частота сердечного ритма и артериальное давление в состоянии покоя
При оценке параметров состояния сердечно-сосудистой системы следует придерживаться ряда общих принципов. Во-первых, чем дальше от центра тела проводится изменение, тем менее адекватны снимаемые показания и тем больше они подвержены влиянию внешних факторов, таких как положение тела, настроение, стресс, время суток и т.п. Устройства для снятия показаний с кончиков пальцев удобны в использовании, но по точности далеки от приборов для регистрации давления на уровне плеча. Во-вторых, все перечисленные выше факторы оказывают влияние на каждый параметр состояния сердечно-сосудистой системы, поэтому при определении базовых значений параметров и при оценке их изменений относительно базовых значений каждое изменение необходимо производить в одном и том же положении в одно и то же время суток. Также важно снимать показания многократно на протяжении недели, что позволит составить более точную картину состояния вашего организма.
Вариабельность частоты сердечных сокращений
В идеале для оценки этого параметра требуются специальные медицинские приборы, достать которые может быть очень сложно. В качестве альтернативы можно использовать спортивный пульсометр в комбинации со специальным приложением для смартфона. Однако не всем пользователям удается получить достоверные данные с помощью этой системы. [Более подробно см. в оригинале статьи.]
Скорость распространения пульсовой волны
Что касается скорости распространения пульсовой волны, выбор применимых устройств еще более ограничен. По мнению автора, наиболее объективные данные предоставляет устройство iHeart. Однако получаемые с его помощью значения значительно отличаются для разных дней изменений даже при поддержании постоянных значений максимально возможного количества переменных. [Более подробно см. в оригинале статьи.]
Метилирование ДНК
Тест на определение биологического возраста по метилированию ДНК можно заказать в компаниях Osiris Green или Epimorphy/Zymo Research. По словам представителей компаний, нормальный уровень вариабельности для повторных тестов одного и того же образца составляет около 1,7 лет для теста Zymo Research и 4,8 лет для теста Osiris Green. Уровень вариабельности для разных дней или в течение одного дня пока остается под вопросом, однако специалисты утверждают, что они сопоставимы для измерений, разнесенных несколько месяцев. Что касается показателей состояния сердечно-сосудистой системы, для этих параметров целесообразно соблюдать воспроизводимость максимального количества внешних условий (времени суток, период, прошедший после приема пищи или физической нагрузки, соблюдаемая диета и т.п.) при прохождении тестирования до и после терапии.
Пример плана проведения ежедневных измерений
Ниже приведен один из возможных вариантов ежедневного снятия показаний состояния сердечно-сосудистой системы, в который включено несколько дополнительных параметров для демонстрации уровня точности инструментов измерения:
- наденьте пульсометр, так как эта манипуляция вызывает кратковременное учащение сердечного ритма, сделайте это в первую очередь;
- сядьте в удобном положении и расслабьтесь на несколько минут;
- измерьте артериальное давление и пульс на левой руке;
- измерьте артериальное давление и пульс на правой руке;
- измерьте скорость распространения пульсовой волны на кончике правого указательного пальца на протяжении 30 секунд с помощью системы iHeart;
- измерьте скорость распространения пульсовой волны на кончике левого указательного пальца на протяжении 30 секунд с помощью системы iHeart;
- измерьте вариабильность частоты сердечных сокращений на протяжении 10 минут с помощью пульсометра и приложения для смартфона.
Воспроизводимость параметров очень важна
На протяжении всего эксперимента, от первого измерения параметров до последнего, очень важно поддерживать стабильную массу тела, рацион питания и уровень физических нагрузок. Значительные изменения в образе жизни могут приводить к последствиям, затрудняющим регистрацию любых результатов с помощью простых методов, предложенных выше. Более того, при проведении измерений необходимо, как уже сказано выше, максимально воспроизводить факторы внешней среды. Эксперименты с разными измерительными устройствами быстро продемонстрируют, насколько велико может быть влияние этих факторов.
[Примерные затраты на проведение исследования в США приведены в статье.]
Схема проведения эксперимента на себе
Процесс изучения вопроса, заказа и приобретения необходимых материалов и устройств, а также проверки качества препарата может занять несколько месяцев. После того, как все решения приняты и материалы приобретены, выберите дату начала эксперимента. После этого придерживайтесь приведенной ниже схемы:
Дни 1-10: 1 или 2 раза в день измеряйте артериальное давление, скорость распространения пульсовой волны и вариабельность частоты сердечных сокращений.
День 10: Сдайте анализ крови и тест на метилирование ДНК.
День 11. Начните 6-недельный курс ежедневного приема препарата.
Дни 53-62. Повторно измеряйте артериальное давление, скорость распространения пульсовой волны и вариабельность частоты сердечных сокращений.
День 62. Повторно сдайте анализ крови и тест на метилирование ДНК.
Где опубликовать результаты?
Если вы проводите эксперимент на себе и ни с кем не делитесь результатами, вы поможете только себе. Настоящую пользу результаты рационального продуманного эксперимента могут принести только при условии, что многие члены сообщества будут размещать полученные данные в открытом доступе, что облегчит процесс планирования официальных клинических исследований и укажет актуальные направления исследований и разработок. Существует множество сообществ людей, проводящих эксперименты на себе с использованием разных соединений и вмешательств. Одним из подходящих ресурсов для размещения описания и результатов персональных экспериментов являются форумы LongeCity. Также можно создать свой собственный сайт или блог.
Публикация должна включать все результаты измерений, названия и дозы принимаемых препаратов, продолжительность терапии, а также возраст, вес и пол экспериментатора. Возраст можно указывать приблизительно, в диапазоне 5 лет. Если вы хотите опубликовать результаты анонимно, это вполне реально, так как отследить ваши данные невозможно без доступа к базе данных проводившей анализы лабораторной службы. Отрицательные результаты не менее важны, чем положительные. Например, при использовании для оценки результатов перечисленных в данной статье параметров вполне возможно, что положительные изменения для людей в возрасте 45-55 лет будут настолько незначительными, что не будут выходить за пределы диапазона случайного шума и ошибок измерения. Подтверждающие это предположение данные также важны и полезны для сообщества, так как помогут в планировании будущих, более эффективных экспериментов.
Евгения Рябцева, портал «Вечная молодость» http://vechnayamolodost.ru по материалам Fight Aging!: How to Plan and Carry Out a Simple Self-Experiment, a Single Person Trial of a Mitochondrially Targeted Antioxidant.
